الکشف عن جینات rol B و rol C فی انسجة الکالس المشتق من تحضین المعلقات الخلویة للجزر (Daucus carota L.) مع pRi
الملخص
أنشئت مزارع المعلقات الخلویة من کالس سیقان نباتات الجزر carrot (Daucus carota L.) وان تعریض الکثافة 3.4× 510 خلیة مل-1 للمعاملة الکهربائیة 250 فولت/ 5 ملی ثانیة شجعت الانقسامات الخلویة وتکوینها 168 من منشأت الکالس التی تطورت لاحقاً إلى مزارع کالس. وادى تعریض مزیج المعلق الخلوی مع 50 مایکرولیتر من بلازمیدات pRi المعزولة من بکتریا Agrobacterium rhizogenes R1601 الى تحفیز الانقسامات الخلویة مبکراً وانتجت232 من منشأت الکالس ونجحت فی تکوین کتلة حیویة من الکالس. واظهرت نتائج اضافة محلول PEG (6000 Mwt.) إلى مزیج المعلق الخلوی وبلازمیدات Ri تشجیعه تکوین المستعمرات الخلویة وتطورها الى الکالس. واکدت نتائج الترحیل الکهربائی للحامض DNA المضخم بتفاعل PCR وجود حزمة واحدة لکل من الجینات rol B و rol C اوزانها الجزیئیة 850 و650 زوج قاعدة والمماثلة لأوزان البادئات المتخصصة المستخدمة. وتبرهن هذه النتائج بصورة قاطعة تضمین جینات rol B و rol C فی جینوم الکالس الناتج.