دراسة لإنزیم الباراوکسونیز المعزول من السائل الامنیونی وتأثیراته ضد التسمم الکبدی والقلبی المستحدث بعقار السزبلاتین فی الجرذان
الملخص
عزل إنزیم الباراوکسونیز من السائل الامنیونی لنساء حوامل طبیعیین فی الأسبوع الأخیر من الحمل. إذ تم فصل حزمة بروتینیة واحدة بتقنیة الترشیح الهلامی سیفادکس نوع G-50 للراسب البروتینی الناتج من عملیة الترسیب بکبریتات الامونیوم (67%) بعد عملیة الدیلزة، وأعطى الناتج من G-50 حزمتین بروتینیتین بعد تمریره على هلام سیفادکس G-100. اذ أظهرت الحزمة الأولى (قمة A) فعالیة عالیة للإنزیم PON1، بعدها قدر الوزن الجزیئی التقریبی للإنزیم باستخدام تقنیتی الترشیح الهلامی والهجرة الکهربائیة ووجد أنه بحدود (+ 43873 350) و(43682 + 278) دالتون على التوالی.دُرست الظروف المثلى لقیاس فعالیة الإنزیم المنقاة من السائل الامنیونی وأظهرت النتائج إن الظروف المثلى لعمل الإنزیم عند ترکیز البروتین مصدراً للإنزیم هی 80 مایکروغرام/ مل باستخدام المحلول المنظم الفوسفات بترکیز 0.14 مول/ لتر عند أس هیدروجینی 8.0وزمن تفاعل 7 دقیقة ودرجة حرارة 45°م و10 ملی مول/ لتر من مادة الأساس الباروکسون واستخدم رسم لاین ویفر– برک لحساب قیمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت مکیلس (Km) وکانت مساویة لـ 80 مایکرومول/ دقیقة و3.79 ملی مول/ لتر على التوالی. درس أیضاً التأثیر الوقائی لأنزیم PON1 ضد التلف فی خلایا الکبد وخلایا القلب المحفز بعقار السزبلاتین فی الجرذان، إذ تم اختیار 35 من ذکور الجرذان البیض والتی قسمت إلى 5 مجامیع، إذ أشارت النتائج إلى إن أعطاء إنزیم الباراوکسونیز المعزول وبجرعة (0.5 ملغم /کغم أو 1 ملغم /کغم یومیا عن طریق البریتون) للجرذان لمدة خمسة أیام قبل وخمسة أیام بعد أعطاء جرعة واحدة من السیزبلاتین (10 ملغم/کغم عن طریق البریتون) أدى ذلک إلى انخفاض معنوی بمستویات إنزیمات (الفوسفاتیز القاعدی (ALP) وGOT(AST) وGPT(ALT) وکریاتین کاینیز (CK)) والبلیروبین الکلی (TB) والمالوندایالدیهاید (MDA) مقارنة بمستویاتها عند مجموعة الجرذان التی تمت معالجتها بجرعة السزبلاتین فقط، وقد استنتج أن الإنزیم له دور فی حمایة خلایا الکبد والقلب من التلف الذی سببه عقار السزبلاتین.