متناظرات انزيم بولي امين اوكسيديز في حليب الامهات المرضعات
الملخص
تم تنقية انزيم بولي امين اوكسيديز Polyamine oxidase ( PAO ) من حليب الامهات المرضعات باستخدام تقنيات الفرز الغشائي ، كروماتوكرافيا التبادل الايوني السالب ، الترشيح الهلامي والهجرة الكهربائية . وتم ولاول مرة فصل ثلاث متناظرات Ia ، Ib ، IIa لانزيم PAO من حليب الامهات الطبيعي وبفعالية نوعية مقدارها 529.6 ، 1008.0 و 520.7 وحدة انزيمية/ ملغم بروتين على التوالي وبتنقية بلغت 229 ، 436 و 225 مرة على التوالي مقارنة بالانزيم الخام . تم دراسة بعض الخواص الحركية المثلى لاكسدة البولي امين ( برمدين) بوساطة انزيم PAO ووجد هناك علاقة خطية بين فعالية كلا من المثماثلات الثلاث وتركيزها ، وان اكسدة المادة الاساس تحدث وبشكل خطي لغاية 60 ثانية ، اما الـ pH الامثل للمتناظرات Ia ، Ib ، IIa هي 8.6 ، 7.2 و 7.2 على التوالي وقيم km لكل من Ia ، Ib ، IIa هي ، و مولار سبرمدين على التوالي .وجد ان المثبط فينايل هايدرازين ثبط فعالية المتناظر IIa كلياً بينما اظهر تاثيرا تثبيطيا متفاوتا على فعالية كلا من Ia و Ib . كما وجد ان المثبط ايودواسيتامايد اظهرس تأثيرات تثبيطية متفاوتة على فعالية كلا من Ia و IIa في حين لم يظهر اي تاثيراً تثبيطياً على فعالية المتناظر Ib . وجدت الاوزان الجزيئية التقريبية لمتناظرات انزيم PAO المنقاة من حليب الامهات الطبيعي انها تبلغ 60255 ، 56234 و 46773 دالتون على التوالي وذلك بوساطة تقنية الترحيل الكهربائي وباستخدام هلام متعدد الاكريلامايد مع (SDS).