دراسة كيموحياتية لإنزيم الكايتينيز وعلاقته بالثلاسيميا

تضمن البحث دراسة سريرية لإنزيم الكايتينيز وعلاقته بمرض الثلاسيميا، اذ وجد ان المعدل الطبيعي لفعالية إنزيم الكايتينيز في مصل دم مجموعة السيطرة (U/ml 1.79 ± 0.10) ووجد انخفاض معنوي في فعالية الإنزيم لدى مجموعة المرضى عند مقارنته مع مجموعة السيطرة. كما وجد أن فعالية الإنزيم لا تتأثر بالجنس في حين تزداد مع تقدم العمر لدى مجموعتي السيطرة والمرضى، وبينت النتائج عدم تأثر فعالية الإنزيم بنوع المرض (ألفا او بيتا _ ثلاسيميا ) وشدة مرض البيتا _ ثلاسيميا (الكبيرة والمتوسطة (واستئصال الطحال. كما وجد ارتفاع معنوي في مستوى كل من إنزيمي الكلوتاميت بايروفيت ترانس امينيز (GPT) و الكلوتاميت اوكزالواسيتيت ترانس امينيز (GOT) والحديد (Fe) والسعة الكلية لارتباط الحديد (TIBC) بينما وجد انخفاض معنوي في مستوى الهيموكلوبين لدى مرضى الثلاسيميا مقارنة بمجموعة السيطرة. ومن خلال ايجاد معامل الارتباط الخطي، تبين ارتباط إنزيم الكايتينيز بعلاقة عكسية معنوية مع الحديد و بعلاقة طردية معنوية مع إنزيم(GPT) لدى مجموعة السيطرة و بعلاقة طردية معنوية مع الهيموكلوبين لدى مجموعة المرضى.أظهرت طريقة عزل إنزيم الكايتينيز من الجسيمات الحالة لبلازما الدم حزمتين بروتينيتين ووجد أعلى فعالية لدى (الحزمة B) مقارنة بطريقة عزل الإنزيم من محلول راسب كبريتات الامونيوم بتشبع (75%) لبلازما الدم اذ وجدت ثلاث حزم بروتينية وكانت أعلى فعالية لدى (الحزمة E) بتقنية الترشيح الهلامي باستخدام عمود الفصل الحاوي على (Sephadex G-75). كما وجد أن الحزمتين البروتينيتين ( BوE) لهما وزن جزيئي39180 ± 1000) دالتون) و( 36307 ± 1000 دالتون) على التوالي ووجد أن عدد مرات التنقية لإنزيم من الجسيمات الحالة لبلازما الدم اكبر من محلول راسب كبريتات الامونيوم. ودرست الظروف المثلى لعمل إنزيم الكايتينيز للحزمتين المعزولتين فوجد ان لهما زمن تفاعل امثل عند الدقيقة (35) و (30) والأس الهيدروجيني الأمثل عند (pH= 7) ودرجة حرارة مثلى (60C°) و (55C°) والتركيز الامثل لمادة الأساس الكايتين الغروي (12 mg/ml) و (10mg/ml) وقيمة السرعة القصوى (2.08U/ml)Vmax و (2.00U/ml) وقيمة ثابت ميكيلس– منتن Km (2.12mg/ml) و (2.00mg/ml) على التوالي وتم تقدير الفعالية البايولوجية لإنزيم الكايتينيز المعزول من بلازما الدم (الحزمتين Bو E) تجاه نمو بعض البكتريا والفطريات الممرضة ووجد أن لإنزيم القابلية على تثبيط نموها بنسبة (100%) للحزمة B)) و(50 %) للحزمة (E).