عزل ودراسة أنزيم السوربيتول ديهيدروجينيز SDH)) من بلازما دم الإنسان

تضمن البحث عزل وتوصيف انزيم السوربيتول ديهيدروجينيز(SDH) من بلازما الدم لشخص طبيعي متبرع سليم من فصيلة الدم (B) بعمر (34 سنة) باستخدام التقنيات الحيوية المختلفة. وقد أظهرت نتـائج تقنيـة الترشيح الهلامي التي أجريت في عمود الفصـل الحـاوي على الهلام (Sephadex G-100) إحتواء محلول الراسب البروتيني الناتج مـن الترسـيب بكبريتات الامونيوم بعد إجراء عملية الديلـزة على حزمتين بروتينيتين وتبين إمتلاك الحزمة البروتينية الثانية (قمة ІІ) فعالية عالية للانزيم، إذ بلغت عدد مرات التنقية للحزمة البروتينية الثانية (8 مرات)، فضلاً عن ذلك تم تحديد الوزن الجزيئي التقريبي لأنزيم ((SDH المنقى جزئياً (الحزمة البروتينية ІІ) باستخدام تقنية الترشيح الهلامي وكان مقداره (38672 دالتون). ثم حددت بعد ذلك الظروف المثلى لعمل الأنزيم المنقى جزئياً، وأظهرت النتائج أن الأنزيم يعمل في المحلول المنظم عند تركيز (100µl) لثلاثي ايثانول امين، وأس هيدروجيني قدره (7) ودرجة حرارة مثلى )40˚م( وعند تركيز (1.5 مولاري( للفركتوز كمادة أساس. وباستخدام رسم لاينويفر- بيرك وجـد أن السرعة القصوى Vmax)) التي يعمـل بها الانزيم تسـاوي (0.53) مايكرومول/دقيقة، وان قيمة ثابت ميكيلس- منتن (Km) تساوي (0.92) مولاري. كذلك أظهرت الدراسة بان هنالك مركبات كيميائية لها تأثير منشط مثل ((EDTA, Mg, Zn، أما مركب فلوريد الصوديوم NaF)) فقد أظهرت النتائج بأن تأثيره مثبط وهو من النوع غير التنافسي لفعالية الأنزيم وعند تركيز (3 m mol/L).