فصل ودراسة بعض الصفات الحركية لبروتين علامة الشيخوخة- 30 من بلازما الإنسان

تم عزل بروتين علامة الشيخوخة-30 من البلازما لشخص سليم بعمر 25 سنة، كما تمت دراسة بعض العوامل المؤثرة على فعاليته بوصفه إنزيماً فضلا عن تحديد وزنه الجزيئي. إذ تم فصل حزمة رئيسة واحدة فقط ذات فعالية عالية بتقنية الترشيح الهلامي للراسب البروتيني الناتج عن ترسيب بروتينات البلازما بكبريتات الامونيوم (60%) بعد عملية الفرز الغشائي (الديلزة) وفصله بالطرد المركزي المبرد، واستخدمت فيما بعد الحزمة لدراستها وتحديد الوزن الجزيئي لمكوناتها باستخدام تقنية الترشيح الهلامي وكانت بحدود 34672 دالتون.أظهرت الدراسة ان الظروف المثلى لعمل الإنزيم (SMP-30) كانت عند تركيز (100 مايكروغرام/مل) باستخدام المحلول المنظم الفوسفات بتركيز (0.022 مول/لتر) عند أس هيدروجيني(8) وزمن التفاعل (18 دقيقة) ودرجة حرارة (49°م) باستخدام تركيز (14 ملي مول/لتر) من مادة الأساس كلوكونولاكتون، وباستخدام رسم لاين ويفر– برك تم إيجاد قيمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت مكيلس (Km) وكانت مساوية لـ (0.65 مايكرومول/دقيقة) و (5.6 ملي مول/لتر) على التوالي. فضلا عن ذلك درس التأثير التثبيطي للعديد من المركبات الكيميائية والدوائية على فعالية الإنزيم, وبينت النتائج أن التأثير التثبيطي لمركبات فينايل فرين وكلوريد الزئبق والنيومايسين كان من النوع غير التنافسي والكافيين كان من النوع التنافسي اما طبيعة تثبيط الزرنيخ ميتا الصوديوم فكان من نوع اللاتنافسي .