مقارنة طرق تشخيص جراثيم Leptospira الروتينية مع تقنية تفاعل سلسلة البلمرة PCR

تضمن البحث إجراء مقارنة لطرق العزل و التشخيص الروتينية مع تقنية تفاعل سلسلة البلمرة(PCR) Polymerase Chain Reaction بهدف عزل وتشخيص جراثيم Leptospira من عينات مرضية و بيئية.تضمنت الطرق الروتينية دراسة الصفات الزرعية و الشكلية باستخدام مجهر الحقل المظلم dark field microscope والمجهر الإلكتروني النافذ transmission electron microscope فضلاً عن استخدام المجهر الضوئي . كما درست بعض الفعاليات الإنزيمية لجراثيم Leptospira وأبدت القدرة على إنتاج إنزيمي الكتاليز والاوكسديز. تم عزل الـ DNA من البريميات المعزولة وتراوحت كميته (5.5-6) مايكروغرام / مايكروليتر وبنقاوة (1.8-1.9) ولغرض المقارنة مع تقنية الـ PCR استخدم بادئ متخصص لتضخيم القطعة (331 bp fragment) من الجين 16S rRNA . بلغت نسبة عزل جراثيم Leptospira المشخصة روتينياً من الدم (0.45%) ومن الإدرار (6.2%) وأعطت نفس النسب عند تشخيصها باستخدام تقنية الـ PCR ، أما عينات سائل النخاع ألشوكي فقد أعطت الطرق الروتينية نتائج موجبة بنسبة قدرها (1.6%) و باستخدام تقنية الـ PCR أعطت نتائج سالبة وبخصوص عينات المياه فقد بلغ عدد العزلات التي خضعت للاختبارات التشخيصية الروتينية المعتمدة في تشخيص جراثيم Leptospira (12) عزلة بنسبة (24%) وعند استخدام تقنية الـ PCR أعطت التقنية نتيجة موجبة لـ (8) عزلات فقط وبنسبة قدرها (16%) .