دراسة كيموحيوية لإنزيم مايلوبيروكسيديز في الدم وعلاقته بتصلب الشرايين

تضمن البحث دراسة كيموحيوية لإنزيم مايلوبيروكسيديز في مصل الدم الإنسان، إذ وجد أن المعدل الطبيعي لفعالية إنزيم مايلوبيروكسيديز (27.71±0.74 U/ml) لمجموعة السيطرة لكلا الجنسين وبفئات عمرية (19-70 year)، ووجد عدم تأثر فعالية الإنزيم بالجنس، في حين تأثرت بالعمر والتدخين. كما وجد ارتفاع معنوي في فعالية الإنزيم لدى مجموعة المرضى المصابين بتصلب الشرايين (38.95±1.01 U/ml) من كلا الجنسين وبفئات عمرية (31-80 year) مقارنة بمجموعة السيطرة. وجد تأثر فعالية الإنزيم بالجنس والعمر والتدخين وعقاقير الستاتين. وجد ارتفاع معنوي في تركيز الكولسترول الكلي وكولسترول البروتين الدهني الواطئ الكثافة والبروتين سي التفاعلي والتروبونين في مجموعة المرضى، في حين وجد انخفاض معنوي في تركيز كولسترول البروتين الدهني العالي الكثافة والبروتين الكلي والألبومين والكلوبيولين والكلوريد والأريل استريز في مجموعة المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة. وجد علاقة معنوية طردية بين فعالية الأنزيم والتروبونين في مجموعة المرضى. كما وجد ارتفاع معنوي في فعالية الأنزيم لدى المرضى الذين كان لهم فحص التروبونين موجباً مقارنة بفعالية الإنزيم لدى المرضى الذين كان لهم فحص التروبونين سالباً. كما تم تنقية إنزيم مايلوبيروكسيديز من مصل دم شخص سليم ظاهرياَ. باستخدام التقنيات الحياتية المختلفة والتي تضمنت الترسيب بكبريتات الأمونيوم والفرز الغشائي والترشيح الهلامي باستخدام هلام Sephadex G-100، وجد أن الفعالية النوعية وعدد مرات التنقية هي (8.865 U/mg) و(25) مرة على التوالي. وتم إيجاد الوزن الجزيئي التقريبي للإنزيم بالترشيح الهلامي وكان (151 ± 1.8 kDa). وتبيّن أن إلانزيم يحتوي على مجموعة الهيم وعنصري الخارصين والكالسيوم، وانه من نوع البروتينات السكرية.تبيّن أن الإنزيم يعمل بظروف مثلى لتحليل مادة الأساس اورثوداينسدين عند الدقيقة الأولى واس هيدروجيني (5) باستخدام المحلول المنظم سترات الصوديوم (0.1 M) ودرجة حرارة (45 °C) وتركيز مادة الأساس (12 mM)، حيث بلغت قيمة السرعة القصوى (24.27 U/ml) وقيمة ثابت ميكليس- منتن (2.443 mM). وجد أن أثيلين ثنائي الأمين رباعي حامض الخليك وأزيد الصوديوم و2-ميركابتوايثانول وكلوريد الصوديوم تعمل على تثبيط فعالية الإنزيم، ووجد أن أعلى تثبيط كان باستخدام أزيد الصوديوم وهو من نوع التثبيط غير التنافسي غير العكسي.