عزل ودراسة خواص أنزيم اليوريز من بذور نبات الباقلاء المحلي Vicia faba L.))

تضمن البحث عزل أنزيم اليوريز من بذور نبات الباقلاء المحلي (Vicia faba L.) باستخدام التقنيات الحياتية المختلفة، حيث تبين من تقنية الترشيح الهلامي احتواء محلول الراسب البروتيني الناتج من الترسيب بالأسيتون بعد أن اجري له معاملة حرارية وترسيبه بالحامض على ثلاث حزم بروتينية، وتبين أن الحزمتين الأولى والثانية تمتلكان فعالية متباينة لأنزيم اليوريز، وفي الوقت الذي تمتلك الحزمة الأولى فعالية نوعية منخفضة لأنزيم اليوريز فان الحزمة الثانية تمتلك فعالية نوعية عالية لأنزيم اليوريز وبنقاوة بلغت (40.1) مرة. فضلا عن ذلك تم تحديد الوزن الجزيئي التقريبي لأنزيم اليوريز المنقى جزئيا باستخدام تقنية الترشيح الهلامي والهجرة الكهربائية وكان بمدى (8000 ± 480000) و(460000 ± 5000 ) دالتون على التوالي. بعد ذلك حددت الظروف المثلى لعمل الأنزيم المعزول، وبينت النتائج أن الأنزيم يعمل في المحلول المنظم (sodium phosphate buffer) عند تركيز امثل (50) ملي مولار واس هيدروجيني امثل (8.3) ودرجة حرارة مثلى 50 درجة مئوية وتركيز (5) ملي مولار للمادة الأساس اليوريا وباستخدام رسم لاينويفر برك وجد أن السرعة القصوى التي يعمل بها الأنزيم تساوي (0.8) وحدة/مليلتر، وان قيمة ثابت ميكيلس – منتن تساوي(6.06) ملي مولار، وأشارت النتائج إلى انخفاض فعالية الأنزيم بصورة تدريجية إلى (70%) و (59%) عند خرنه لمدة (30) يوم عند درجة حرارة 4 درجة مئوية ودرجة حرارة الغرفة على التوالي. كذلك أظهرت المركبات مثيل يوريا وكلوريد النحاس فعلا تثبيطياً لعمل الأنزيم وكان التثبيط من النوع التنافسي.اخيرا بينت النتائج بعدم وجود فروقات معنوية بين فعالية أنزيم اليوريز المعزول من بذور الباقلاء المحلي وفعالية اليوريز المستخدم في العبوة القياسية (Standard kit) لقياس تركيز اليوريا في دم بعض الأشخاص الأصحاء والمرضى.